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编号:13379638
痰TB-RNA检测在肺结核中的诊断价值(2)
http://www.100md.com 2019年5月5日 《中国实用医药》 2019年第13期
     1. 2 纳入及排除标准 纳入标准[5]:①活动性肺结核研 究对象诊断依据为《肺结核诊断和治疗指南》;②研究对象愿意配合治疗。排除标准[6]:①患有艾滋病病毒(HIV)感染及严重的全身疾病;②患有精神疾病;③同时参与其他研究项目。

    1. 3 方法 采集两组研究对象在早餐后的痰液作为标本, 每个标本分3份分别通过罗氏培养法、涂片镜检法以及TB-RNA法进行检测, 具体方法如下。

    1. 3. 1 TB-RNA检测方法 使用SArTB试剂盒, 具体操作为:①将标本和TB裂解稀释缓冲液按照1∶100进行混合稀释, 用C5H10O3处理的无菌水制备10 mmol/L柠檬酸钠为TB裂解稀释缓冲液。②将稀释的溶液采用超声波清洗仪进行超声处理, 超声条件设定为300 W、15 min。③在超声结束后, 采用移液枪吸取2 μl加入倒30 μl扩增检测液(pH为8.1的40 mmol/L的Tris-Hcl缓冲液)中。④按操作说明设定恒温荧光检测仪的实验参数, 荧光素通道为6-羧基荧光素(42℃, 1 min), 共40个循环;1 min记录1次荧光信号 ......
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