高危型HPV—DNA联合液基细胞学检测在宫颈病变中的应用分析
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[摘要] 目的 探讨高危型人乳头瘤病毒DNA(HPV-DNA)联合液基细胞学(TCT)检测在宫颈病变中的应用。 方法 选取本院2011年1月～2012年6月妇科收治的宫颈异常患者180例，随机平均分成对照组和观察组各90例，对照组采用TCT筛选方法，观察组用TCT联合HPV-DNA筛选方法，并进行活检判断，比较两种方法的敏感度和特异度。 结果 对照组90例，检出阳性29例，病理检验阳性45例，敏感度为64.4%；观察组90例，检出阳性41例，病理检验阳性54例，敏感度为75.9%。对照组CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈浸润癌检出率明显少于观察组(P < 0.05)。 结论 使用HPV-DNA联合液基细胞学检测在宫颈病变，可明显提高宫颈病变诊断准确性。
[关键词] 宫颈病变；TCT；HPV-DNA；对比分析；筛选
[中图分类号] R711.74 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)02(b)-0052-02
宫颈病变指的是在宫颈区域中发生的各种病变。该病近年来发病率有所增加，已是妇科常见肿瘤之一。若能及时救治，早期发病治愈率可达90%以上。因此，加强对宫颈癌筛查，早发现早治疗早期宫颈癌及癌前病变，具有重要的现实意义和临床意义[1-2]。本院近年采用液基细胞学(TCT)检查和高危型人乳头状瘤病毒DNA(HPV-DNA)检测技术，对180例宫颈癌筛查标本进行检测分析，现将情况报道如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
本组研究对象为本院2011年1月～2012年6月妇科收治的宫颈异常患者180例。其中，年龄最大75岁，最小24岁，平均(44.0±7.7)岁；均无子宫切除和宫颈手术史；检查时避开月经期，无妊娠，3天内无阴道用药或者冲洗，3天内无性生活；产0～3次。随机分成观察组和对照组各90例，两组在年龄、病症表现、健康状况、产次及疾病史等方面均差异无统计学意义。
1.2 仪器和试剂
采用ABI9700基因扩增仪及广州达安基因公司人乳头瘤病毒基因分型测试试剂盒。
1.3 标本采集和检测方法
对照组采用TCT筛选方法，观察组用TCT联合HPV-DNA筛选方法。在筛选过程中，如果发现有一项异常，则定为阳性病例，并行阴道镜下活检。以病理检验阳性(活检结果)为标准判断，比较两种方法的敏感度和特异度。
对照组采用TCT筛选方法，棉签清洁宫颈口，将子宫颈刷轻轻插入宫颈内约1 cm处，顺时针旋转5～ 10圈，停10 s取出宫颈刷，置入细胞液中，严格按操作规程进行处理，制细胞薄层涂片，乙醇固定，巴氏染色法染色，晾干、封片。
观察组用TCT联合HPV-DNA筛选方法，棉签清洁宫颈口，专用HPV采样刷，轻轻插入宫颈内约1 cm处，逆时针旋转3圈，停10 s采样刷置入标本储存瓶，折多余部份，并将盖子盖好。严格按操作规程进行处理，按照检测剂盒说明书，检测已知16种高危型HPV-DNA。
对所有对象行阴道镜活检，窥器暴露宫颈，棉签清洁宫颈口，观察分泌物，观察宫颈形状，醋酸棉球温敷宫颈，查看异常阴道镜图像，阴道镜下多点取材活检或者常规定位取活检。然后活检标本用福尔马林液固定，送病理检查。
1.4 结果判定
诊断阳性指标定为标本中检出的HPV-DNA≥ 1.0 mg/L，细胞学大于ASCUS者均进行阴道镜下宫颈口四象限活检及颈管搔刮术，病理结果以CIN I及以上病变为阳性结果[3]。
1.5 统计学方法
采用SPSS 13.0统计软件，计量资料行t检验，计数资料行χ2检验，P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组检验出阳性及敏感例数比较
对照组90例，检出阳性29例，病理检验阳性45例，敏感度为64.4%；观察组90例，检检出阳性41例，病理检验阳性54例，以病理检验阳性(活检结果)为标准，敏感度为75.9%。观察组敏感度明显高于对照组(P < 0.05)。
2.2 两组检验出的病理结果对比
对照组CINⅠ(73.9%)、CINⅡ(56.3%)、CINⅢ(50.0%)和宫颈浸润癌(50.0%)检出率以病理检验阳性(活检结果)为标准，分别明显少于观察组CINⅠ(81.3%)、CINⅡ(66.7%)、CINⅢ(75.0%)和宫颈浸润癌(66.7%)，差异有统计学意义(P < 0.05)，详见表2。
3 讨论
宫颈病变是指在宫颈区域发生的各种病变。其中，子宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一，严重威胁着患者的健康和生命。近年来，该病发病率明显增加且发病年龄日趋年轻。有研究表明，若发现及时，早期宫颈癌治愈率可达90%以上。因此，及早准确发现，并针对性治疗，对于宫颈癌及癌前病变具有重要意义。
由于该病是一个发展的、不断演变的过程，早期临床症状不明显，很容易漏诊和误诊。目前常用的检测方法是通过阴道镜、TCT法、HPV-DNA检测等。
阴道镜筛查方法是最早的筛查方法，能定位并进行病理活检，诊断结果明确，但是对病变评估不足，检查存在盲区，耗时较长。TCT法标本满意度和异常检出率明显提高，但在腺体病变方面敏感性低。HPV-DNA检测能够更好地确定HPV的感染。
有研究表明，TCT联合HPV-DNA筛查作为一种新型的检测手段，能更有效地检测出宫颈阳性病变[4]。本组研究表明，对照组敏感度为64.4%；观察组敏感度为75.9%。对照组CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈浸润癌检出率明显少于观察组(P < 0.05)，与研究报道一致。
目前，宫颈细胞学涂片检查仍然是患者易于接受的简单有效的宫颈癌筛选方法。TCT有较高的阳性筛查率，但仍有一定的误诊和漏诊率。补充HPV-DNA检测有更好的阳性筛查率，而且与病理级别呈正相关[5]。TCT与HPV-DNA检测结合能提高宫颈病变检出率，两者都阳性时预测值更高，但费用较高，目前在我国尚不适合筛查，应根据实际情况选择两种方法不同组合的筛查方案[6]。总之，笔者认为，TCT和高危型HPV- DNA检测的联合应用可以提供比单项检测技术更可靠的结果 ......
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